PENJELASAN LENGKAP PENGETAHUAN MEDIA MIKROBIOLOGI YANG WAJIB DIKETAHUI DAN DIHAFAL !!! UPDATE
1. Agar Darah (Blood Agar Plate)
Uraian Deskripsi :
- Media diperkaya oleh darah
- Warna plate merah
- Isolasi dan membiakkan gram positif / kuman fastidious
- Agar infusi dari tryptic soy agar (TSA) diperkaya dengan 5 - 10% darah defibrinasi dari domba, kelinci dan manusia
- darah sebagai pengaya untuk pertumbuhan bakteri, mendeteksi dan karakteristik dari aktivitas hemolitik
Komposisi :
- Agar nutrisi +- 5 - 10% darah steril
- Yeast extract
- L-cysteine
- Hemin
- Vitamin K
Contoh Bakteri (koloni) :
- Selektif Staphylococcus aures (kuning keemasan)
- Alfa hemolisa (kehijauan di sekitar koloni)
- Eschericia coli (abu-abu)
2. Agar Cokelat (Blood Agar Plate)
Uraian Penjelasan :
- Warna plate cokelat
- Enrichment agar medium
- khusus untuk meningkatkan pertumbuhan Haemophillus dan bakteri fastidious
- Agar dari darah domba dipanaskan untuk melepaskan hemoglobin eritrosit dan nicotinamide-adenin dinucleotida (NAD) atau darah domba diganti dengan 2% hemoglobin dan larutan suplemen kimia (iso-viotalex)
- Disimpan pada suhu 4 0C, inkubasi 35 0C
- Pengaya yang digunakan harus mengandung hemoglobin dan NAD
Komposis :
- Dibuat dari AD yang dipanaskan 75 - 80 0C
Contoh Bakteri (Koloni) :
- Salmonella thypi
- Vibrio cholera
- Neisseria gonorhoe (Selektif)
3. Simon Citrate Agar (Agar miring hijau)
Uraian Penjelasan :
- untuk membedakan gram-negatif batang penghuni usus
- untuk menentukan apakah mikroorganisme dapat menghasilkan sitrat dengan sumber karbon untuk metabolisme dan menghasilkan alkalinitas
- pH medium +- 6,9
- Inkubasi pada suhu 35 0C sampai 4 hari
- Pemecahan garam ammonium menghasilkan pH medium berada pada kisaran basa yang mengubah warna indikator BTB dari hijau menjadi biru
Komposisi :
- MgSO4
- Ammonium hydrogen phosphate (sumber) nitrogen
- K3HPO6
- Sodium citrate dihydrate (pengganti gula-gula)
- NaCl
- Brom Thymol Blue (Indikator)
Contoh Bakteri :
- Salmonella parathypi B
- Enterobacter aurogenes
- Klebsiella sp.
- Pseudomonas sp.
4. Mac Conkey Agar (Plat Ungu)
Uraian dan Penjelasan :
- Media selektif differensial utama
- Menyeleksi golongan bakteri enterobacteriaceae dan batang gram negatif pada flora campuran serta membedakannya menjadi LF (Laktosa Fermenter) dan NLF (non-Laktosa Fermenter).
- Inhibitor untuk gram positif dan untuk menumbuhkan gram negatif
- Gram negatif : koloni pink sampai merah, dikelilingi presipitat empedu
- Gram negatif NLF : koloni tidak berwarna / transparan
- Gram negatif LF : koloni tidak berwarna pada 24 jam.
Komposisi :
- Pepton
- laktose (sumber karbon)
- bile salts (inhibitor)
- NaCl
- Neutral red (indikator)
- Kristal violet (inhibitor)
- agar
Contoh Bakteri (koloni) :
- Laktosa kuat (merah) : E. coli dan Klebsiella sp.
- Laktosa lemah (tidak berwarna) : Citrobacter sp.
- NLF (transparan) : Proteus sp. , Pseudomonas sp. , Salmonella sp. , Shigella sp.
- Eschericia coli (selektif)
- Staphylococcus aureus
- Salmonella thypi
- Vibrio cholera
5. Mannitol Salt Agar (MSA) (Plat Pink)
Uraian dan Penjelasan :
- Medium selektif dan differensial utama untuk bakteri Staphylococcus sp.
- Konsentrasi garam tinggi menghambat bakteri gram negatif dan gram positif kecuali Staphylococcus
Komposisi :
- Bile salts (inhibitor)
- Manitol (sumber karbon)
- Phenol red (indikator)
Contoh Bakteri (koloni) :
- Staphylococcus aureus (kuning gelanggang) selektif
- Micrococcus (kemerahan zona merah sampai ungu)
6. Methyl Red-Voges Proskauer (MR-VP) (seperti NA)
Uraian dan Penjelasan :
- MR dapat menguji kemampuan mikroorganisme dalam menghasilkan dan mempertahankan asam sebagai hasil produksi akhir dari fermentasi glukosa
- VP dapat menentukan kemampuan mikroorganisme dalam menghasilkan asetil metil karbinol (aseton dalam fermentasi glukosa)
- bila ditambahkan MR akan berwarna merah dan pH asam dan yang lain akan netral seperti aceton, acetyl methyl carbinol
- bila ditambahkan alfa-naftol dan KOH 40% aseton dioksidasi oleh diasetil menghasilkan udara dan basa
- alfa-naftol bereaksi dengan diasetil dan komplek guanidine (pink-merah)
- Pepton
- NaCl
- K3HPO4
- Glukosa
- pH 6,9
Contoh Bakteri (Koloni) :
- jika MR positif : E.coli, S. aureus, S. thypi, S. parathypi, Shigella sp.
- jika VP positif : E. aerogenes, V. cholera, K. pneumoniae
7. Muller Hinton Agar (MHA)
Uraian Deskripsi :
- Medium tidak berwarna / Transparan
- Uji Susceptibility (kepekaan) bakteri terhadap antibiotik
- Uji hidrolisis pati
Komposisi :
- Infusion hewan
- asam casamino
- Pati
8. Nutrient Agar (NA)
Uraian Deskripsi :
- Untuk membedakan bakteri non fastidious
- membedakan Neisseria apatogen dan patogen (Neisseria gonorhoeae dan Neisseria meningitidis)
- Neisseria non fastidious tumbuh sedangkan bakteri patogen tidak tumbuh
- mengandung nutrisi yang minimal
- konsentrasi protein rendah
- Beef Extract (sumber KH)
- Pepton (sumber nitrogen)
- Agar (bahan untuk nutrisi)
- pH 6,8 - 7,0
Bakteri yang tumbuh :
- Salmonella thypi
- Staphylococcus epidermidis
- Neisseria sp.
9. Salmonella - Shigella Agar (SSA) (Plat Oranye)
Uraian Deskripsi :
- Media selektif differensial
- Menyeleksi Salmonella dan beberapa strain Shigella
- Membedakan bakteri yang menghasilkan koloni yang karakteristik pada medium
- Na. Sitrat dan Brilliant green menghambat gram positif dan beberapa gram negatif LF normal
- Bakteri memfermentasi laktosa dan asam sehingga indikator menjadi warna pink-merah
Komposisi :
- Beef ekstrak
- Pepton
- Bile salt (inhibitor)
- Na. sitrat (inhibitor)
- Brilliant green (inhibitor)
- Laktosa (sumber karbohidrat)
- Neutral red (indikator)
- Na. tiosulfat (sumber sulfur)
Bakteri yang tumbuh :
- Shigella (selektif)
- S. thypi
- E. coli
- V. cholera
10. Thiosulfat Citrat Bile Salt Sucrose (TCBS) / Agar Hijau
Uraian/Penjelasan :
- Medium selektif untuk mengisolasi bakteri Vibrio sp.
- Membedakan produksi karakteristik koloni dari spesies Vibrio sp.
- Vibrio sp. tumbuh kerdil pada media khusus untuk isolasi Salmonella dan Shigella dengan menghasilkan koloni tidak berwarna pada media MCA
- Na. sitrat, Na. tiosulfat, Ox-gall menghambat gram positif kokkus dan gram negatif batang normal / apatogen
- pH tinggi pada TCBS menumbuhkan Vibrio sp. dan menghambat bakteri lain
Formula / Komposisi :
- Yeast extract
- Pepton
- Sukrosa (Karbohidrat)
- Na. sitrat (inhibitor)
- Na. tiosulfat (inhibitor)
- Ox-gall (10% larutan) (inhibitor)
- NaCl
- Ferri citrate
- BTB (Brom timol blue) (indikator)
Bakteri yang tumbuh :
- Vibrio cholera (koloni kuning) (selektif)
- S. aureus
- S. thypi
- E.coli
11. Triple Sugar Iron Agar (TSIA) (Agar miring merah)
Uraian / Penjelasan :
- Untuk menentukan bakteri gram negatif batang glukose - fermenter / non glokose fermenter
- Warna Lereng / Warna Dasar Agar miringnya (M/K, K/K, M/M)
- M/K (Merah/Kuning) memfermentasi glukosa dan tidak memfermentasi laktosa
- K/K (Kuning/Kuning) memfermentasi glukosa (asam), sukrosa (asam) dan laktosa (asam)
- M/M (Merah/Merah) tidak memfermentasi glukosa, sukrosa dan laktosa
- jika ada gelembung gas bersifat aerogenik (menghasilkan CO2 dan H2)
- Bakteri Gram negatif mampu untuk memfermentasi hanya glukosa
Komposisi / Formula :
- Media extract
- Yeast extract
- Pepton (sumber karbon / nitrogen)
- glukosa
- laktosa (karbohidrat)
- sukrosa
- Na. thiosulfat (indikator H2S)
- NaCl
- Ferricitrate
- Phenol red (indikator)
Bakteri yang tumbuh :
- M/K (S.thypi, Bacillus, S.shigella)
- K/K (E. aurogenesa, Klebsiella, E.coli)
- M/M (S.aureus, S.epidermidis, Pseudomonas)
12. Trypticase Soy Broth (TSB)
Uraian / Penjelasan :
- All purpose medium untuk mendukung pertumbuhan bakteri dengan cepat tanpa penambahan suplemen
Komposisi / Formula :
- trypticase dan phytone (sumber protein)
- NaCl (stabillitas osmotic)
- Glukosa (sumber karbohidrat)
- K2HPO4 (penyangga / buffer)
Bakteri yang tumbuh :
- S. pneumoniae dll
13. Trypthopan broth (1%)
Uraian / Penjelasan :
- untuk uji indol dan khusus untuk mengidentifikasi spesies dari Enterobactericeae dan batang gram negatif non-glukose fermenter
- enzim trypthopanase berperan menghidrolisis trypthopan untuk menghasilkan indol, asam piruvat dan ammonia
- reagen kovac digunakan untuk menguji batang gram negatif non-glukose fermenter dan bakteri anaerob
Komposisi / Formula :
- trypticase (stabillizer osmotic)
14. Urea agar dan broth
Uraian / penjelasan :
- untuk mendeteksi kemampuan bakteri dalam menghidrolisis urea
- untuk mengidentifikasi golongan bakteri enterobactericeae
- jika urease diproduksi medium akan berwarna pink menyala (Protease sp. dan Klebsiella sp.)
- reaksi positif ditandai dengan seluruh kaldu berwarna merah
Komposisi / Formula :
- Pepton
- Glukosa (Sumber Glukosa)
- K2HPO4
- Phenol red (indikator)
- NaCl
Bakteri yang tumbuh :
- Proteus sp.
- Klebsiella sp.
15. Thayer Martin (Cokelat)
Uraian / Penjelasan :
- Medium selektif untuk bakteri Neisseria gonnorhoe dan Neisseria meningitidis (anaerob)
- Koloni : bulat 2-3 mm, jernih dan mengkilat
- Mengandung antibiotik yang secara bersama-sama menghambat flora normal dan mencegah pertumbuhan dari beberapa bakteri lainnya.
Vancomycin : menghambat bakteri gram positif kokus
Collistin : menghambat gram negatif batang
Trymethroprim : mencegah swarming Proteus sp.
Nystatin : mencegah pertumbuhan fungi
Formula / Komposisi :
- Hemoglobin
- Vitamin
- Cocarboxylase
- Diphoaphopyridine nucleotida
- Glutamin
16.