TATALAKSANA PEMERIKSAAN MIKROSKOPIS MALARIA UPDATE

Senin, 09 Januari 2023

MUHAMMAD ARIEF FADILLAH, S.ST, M.KES

Pemeriksaan Parasit Malaria di Laboratorium

adalah Pemeriksaan darah penderita yang diduga malaria, baik secara pemeriksaan mikroskopis maupun pemeriksaan cepat dengan Rapid Diagnostic Test (RDT). Penderita dinyatakan positif malaria apabila pada pemeriksaan secara mikroskopis ditemukan Plasmodium sp. dalam darahnya atau apabila pemeriksaan RDT positif.

Alat dan Bahan dalam Pemeriksaan Mikroskopis Malaria

1. Slide/Object glass

2. Lancet steril

3. Kapas

4. Alkohol 70%

5. Minyak imersi

6. Larutan buffer (pH 7.2)

7. Tissue halus

8. Counter dan Timer

9. Botol pembilas

10. Pipet kecil dan Tabung reaksi

11. Botol penyimpan Giemsa dan botol buffer
12. Gelas ukur 5 cc dan 100 cc

13. Larutan Giemsa

14. Kertas lakmus

15. Slide box

Larutan Giemsa

Beberapa hal yang harus diperhatikan :

1. Giemsa stock disimpan dalam botol coklat dan hindari sinar matahari langsung

2. Untuk menghindari rusaknya giemsa stock disimpan dalam botol2 kecil

3. Giemsa stock tidak boleh dikocok/diaduk.

4. Larutan giemsa yang sudah tercampur dengan larutan buffer jangan dimasukkan

kembali ke dalam giemsa stock.

Menguji Mutu Giemsa

Melakukan pewarnaan pada 1-2 SD è

Hasil sesuai dengan std èbaik, giemsa bisa dipakai.

Menggunakan kertas whatman no.2 1-2 tetes giemsa stock è

3-4 tetes metil alkohol absolut è

terbentuk 3 lapisan : lingkaran biru, cincin ungu dan lingkaran tipis merah

Larutan Buffer pH 7,2

Dapat dibuat dengan 2 cara :

1. 1 tablet buffer dalam 1 liter aquades

2. 0.7 gr KH₂PO₄dan 1 gr Na₂HPO₄ dalam 1 liter aquades

Pengambilan Darah

Terbaik è darah dari ujung jari / ibu jari kaki (6-12 bln) / ujung tumit kaki (<6 bln)

Darah vena è gunakan antikoagulan (tidak lebih dari 1 jam)

Jenis Sediaan Darah Malaria

Sediaan Darah Tebal

Sejumlah darah yang besar terhemolisis, sehingga parasit terkonsentrasi pada satu area

Sediaan Darah Tipis

Terdiri dari satu lapisan sel yang tersebar dan membantu identifikasi parasit malaria

Etiket (Label)

Pemberian label/etiket pada bagian ujung object glass dekat sediaan darah tebal, bisa menggunakan kertas label atau object glass frosted. Pada label dituliskan

KODE KABUPATEN/KOTA/KODE FASYANKES/ NOMER REGISTER/BULAN/TAHUN

Cara Kerja :

• Tuliskan etiket pada salah satu ujung objek glass

• Pegang tangan kiri pasien dengan mengahadap ke atas

• Bersihkan jari menggunakan kapas alkohol

• Dibiarkan mengering

• Tusuk bagian yang akan diambil darahnya dengan cepat menggunakan lanset.

• Bersihkan tetes darah yang pertama keluar

• Teteskan darah pada objek glass (± 2 µl untuk SD tipis dan ± 6 µl untuk SD tebal)

• Bersihkan sisa darah di ujung jari

• Letakkan SD pada posisi datar

• SD tipis è tempelkan ujung objek glass lain pada SD sampai darah menyebar

• Dengan sudut 45⁰ geser objek glass tsb dgn cepat ke arah yg berlawanan

SD tebal è dengan menggunakan ujung objek glass lain dibuat homogen dengan gerakan memutar dari arah luar ke dalam membentuk bulatan dengan diameter 1 cm.

• SD dikeringkan pada tempat yang datar. Dapat menggunakan kipas angin.

• SD harus dihindarkan dari gangguan serangga, debu, panas, kelembaban yang tinggi dan getaran.

• Setelah kering, diwarnai.

Kesalahan - kesalahan dalam pembuatan sediaan darah tepi

Pewarnaan sediaan darah

Tahap 1

Sediaan darah tipis yang sudah kering difiksasi dengan methanol. jangan sampai terkena sediaan darah tebal

Tahap 2

Letakkan pada rak pewarna dengan posisi darah berada di atas

Tahap 3

Siapkan 3% larutan giemsa dengan mencampur 3 bagian giemsa stock dan 97% bagian larutan buffer

Tahap 4

Tuang larutan giemsa 3% dari tepi hingga menutupi seluruh permukaan object glass. biarkan selama 45-60 menit

Tahap 5

Tuangkan air bersih secara perlahan-lahan dari tepi object glass sampai larutan giemsa yang terbuang menjadi jernih. angkat dan keringkan sediaan darah. setelah kering sediaan darah siap diperiksa.

Perbedaan warna pengaruh pH pengenceran

Cara hitung parasit malaria

Biasanya penghitungan ini digunakan untuk uji efikasi atau test resistensi obat anti malaria

Ada tiga cara hitung parasit :

1. Parasit per 200 leukosit atau lebih, bila parasit kurang dari 100 lanjutkan sampai max 500 leukosit atau lebih.

2. Parasit per lapang pandang / rata2 dalam 1 lp ada berapa, misal : 5/1 lp artinya rata2 1 lp ada 5 parasit.

3. Pos+ = 1-10 parasit rata2 per 100 lp.

Pos++ = 11 - 100 parasit rata2 per 100 lp.

Pos+++ = 1 - 10 parasit rata2 per 1 lp.

Pos++++ = 11 lebih parasit rata2 per 1 lp.

(INI CARA MENGHITUNG DI SEDIAAN DARAH TEBAL)

Cara penulisan diagnosa pemeriksaan malaria

Pf = ditemukan parasit tropozoit stadium ring form

Pfg = gametosit saja

Pf+g = ring dan gametosit

Pv = semua stadium

Pm = semua stadium

Po = semua stadium

Mix (Pf + Pv)

Mix (Pv + Pm + Pfg)

Pf+ / Pf +++

Pfg+ / Pfg +++

Pf+g +++

Pv ++

Pm ++++

Po ++

Mix (Pf+Pv) +++

Pf 3/1 atau 3/1 lp

Pfg 25/5 atau 25/5 lp

Pv 89/1 atau 89/1 lp

Pm 10/2 atau 10/2 lp

Po 9/50 atau 9/50 lp

Mix (Pf+Pv) 6/1 atau 6/1 lp

Pf = Plasmodium falciparum

Pv = Plasmodium vivax

Po = Plasmodium ovale

Pm = Plasmodium malariae

Sediaan Darah Tebal

Cara menghitungnya adalah sejak ditemukan parasit pertama kali pada lapang pandang, kemudian mulai dihitung jumlah parasit dan leukosit secara bersamaan dan seterusnya pada lapang pandang berikutnya. walaupun tidak ada parasitnya, leukosit tetap dihitung hingga mencapai min 200 leukosit atau lebih. bila parasit kurang dari 100 per 200 leukosit dilanjutkan hingga mencapai 500 leukosit.

Cara Menghitung